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使用体外诊断试剂存在的问题及解决方法
更新日期:2013-04-15  浏览:1832
 

蒙开喜,广西横县人民医院检验科,广西,横县,530300

【关键词】诊断试剂;问题;分析
【中图分类号】R446.1 【文献标识码】A 【文章编号】1007-8517(2009)14-0121-01
目前生化试剂种类繁多,如何正确合理的使用,充分提高 检验结果的准确性,以便更好的为临床诊断服务。通过我们 多年来使用伊利康试剂的实践经验,结合各检验项目的特点, 总结出以下几个方面的体会供大家参考,希望大家提出宝贵 的意见和建议。
优质的仪器用水 
优质的仪器用水是使用好检验试剂的一个十分重要环节之一。因为测定离子类项目:如铜、铁、锌、钙、Mg、磷,虽然现在一般医院的生化仪都带有制水系统,但制水系统基本都是制备去离子水,离子交换树脂在使用一段时间后交换能力明显下降,需要定期进行更换,否则制备的水离子含量多,使用含离子超标的水冲洗仪器,直接影响检验结果。再如血氨、二氧化碳项目,如果水质不好,仪器用水中本身含氨和二氧化碳 就很高,则检测该项目的结果也会受到严重的影响。还有如果血清中含有GLDH,而仪器用水存在氨时,可消耗NADH,使利用NADH的酶联监测法结果偏高。解决办法:定期监测水质,当仪器用水的电阻小于1.0μm/cm时要更换离子交换树脂或活性炭。
标本的及时分离及测定
 标本的及时分离及测定是用好检验试剂的首要环节。因为凡是利用NADH转化为NAD变化率来检测其物质含量的试验都或多或少受到血液存放时间的影响。原因是全血存放时间越长,红细胞利用血清中的糖进行无氧酵解产生丙酮酸,丙酮酸使NADH转化为NAD,这样使测定结果假性升高。解决办法:
①作好与临床的沟通,对抽血人员和标本运送人员(传递人员)进行培训;
②及时分离血清并及检测;
③也可将全自动生化分析仪上的延迟时间设置大于60秒,这样试剂在延迟期内消除丙酮酸的干扰,可完全避免假阳性结果的出现。
交叉污染
在使用全自动生化分析仪时,仪器的交叉污染现象是引起实验结果偏离的一个原因。由于全自动生化分析仪试剂针需要接触各种试剂,一般难以彻底清洗干净,所以容易造成分 析项目的携带污染.而生化项目的测定仅需要几微升样本,试剂只是几百微升,尤其在没有自动冲洗程序的流动池式生化分析仪上,由于前带现象的存在,如果前一个样本为高值样 本,则接后的第一个低值标本结果应慎重报告。不仅没有冲洗程序的生化分析仪器上有这种现象,就是具有自动冲洗程序的全自动生化分析仪也有交叉污染,如有的自动生化分析仪,它的试剂吸针(Probe)、样品吸针及反应搅拌棒是利用高压冲洗液冲洗,然后用压缩空气吹干,有时由于洗液压力和压缩空气的压力偏低,使试剂吸针、样品吸针及反应混匀棒冲不干净、吹不干,从而导致反应池之间相互污染、试剂间交叉染,使检验结果偏离。另一个值得注意的问题是许多生化仪器由于长期频繁的利用,使加样针和试剂针的注射器磨损加重或注射器的“特氟龙”吸头不及时更换,使吸样针或试剂针密封层增大,产生泄漏现象也是造成样本间及试剂间相互污染的一个重要原因。试剂吸样或样品吸样不准确,通常导致利用速率法测试的标本系统偏低或偏高。众所周知,速率法计算因子是由加样体积和试剂体积参与确定的,如果加样体积或加试剂体积不准,导致真正速率计算因子和理论计算因子偏离,从而使检测结果不准确。解决办法:
①定期进行仪器维护保养;
②按要求及时更换零部件;
③定期对仪器进行校准;
④每天应用无水乙醇擦洗并定期更换干燥棒,保证比色杯清洗后不留残液,避免比色杯的交叉污染。
检验项目间的交叉污染在全自动生化分析仪的使用中,我们发现一个项目会影响紧随其后项目的测试结果,造成这种影响的原因之一是一种试剂中含有另一试验的测定物质而直接干扰其测试结果。原因之二是一种试剂中含有改变另一试验反应条件或影响其反应进程的物质而间接干扰其测试结果。比如:在TP试剂中含有大量的CuSO4,如果将Cu放在TP项目的后面检测,会使检测结果偏高或重复性差。再如P放在含有磷酸盐的项目后面,TBA放在含有胆酸盐的项目后面都会使检测结果偏高或重复性差。LDH放在ALTAST的项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。Mg放在ALP等含有镁离子项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。Ca放在α-AMY项目后面可能会使检测结果偏高或重复性差。另外我们发现相邻两个项目的Ph值相差太大的项目,也会对测定结果产生影响,比如TPAlb之间Ph相差较大,会互相干扰,TBA放在Alb后面测定,会使测定结果偏低等等。解决办法:
①调整实验的前后顺序来消除这种影响;
②在造成污染的项目和受污染的项目之间设置清洗剂并设定进行清洗的次数。
校准液的正确使用
由于目前生产厂家提供的校准液并非通用的,只适用于某一特定的分析系统。同一项目不同方法学之间有很大差异,同一项目不同方法学的校准液更不能混用,但是在临床检验中经常会发生胆红素钒酸盐法用重氮法的校准液校准,乳酸脱氢酶L—P法用P—L法校准液校准。TBA循环酶法用比色法校准液校准等都会造成测定结果不准确。解决办法:
①建议结合各实验室条件选择适合自已实验室的校准品,如有条件可进行系统溯源;
②建立满足在同一方法学、同一测定条件、与理论计算的factor值差异不大,没有发现有明显影响因素,方可进行校正测定;
③建立一个可靠的参考系统作为准确性基础,然后将准确性转移到“使用方法”测定中去,使“使用方法”测定结果可溯源到参考系统所提供的准确性基础上来。在实现溯源性目标过程中,永远以患者新鲜标本为实验对象,以方法学对比试验方法为验证手段。采用回归方程进行统计分析,斜率接近1,截距较小,说明“使用方法”对标本测定结果和溯源目标参考系统对标本检测结果非常接近,检测结果可靠。
不同批号试剂相混的问题
目前将不同批号试剂混在一起使用的现象在检验中经常发生,当然这一方面是为了节省成本,另一方面为了方便。但是不管是什么品牌的试剂,因不同批号的试剂生产时间不同, 试剂中工具酶活性会有差异,底物浓度随时间长短也会发生水解。因此混在一起使用而又不定标,可能会导致检测结果的不准确。还有的试剂开瓶时间太长,空气中的灰尘或细菌进入瓶中,因试剂中含有大量的蛋白质和盐,是细菌生长的最好条件,虽然有的试剂添加了防腐剂,但防腐剂的效果是有一定限度的,而且绝大多数厂家的试剂中是没有加防霉剂的。所以不同批号的试剂混在一起使用如处理不好会影响检验结果的准确性。解决办法:
①不同批号试剂建议不要混用,如果混用最好重新定标;
②试剂瓶在仪器内使用时间不要过长,及时更换;
③一般每个试剂瓶内由于试剂针不能吸完,或多或少都会留有几毫升的试剂,如果是同一批号可以将未开瓶的同一批号试剂往里倒,但如果不是同一批号的试剂时倒人后最好定标,最好的做法是将每个批号的剩余试剂留起来待一定数量后混在一起,然后重新定标后检测。 
通过我们这几年使用伊利康试剂,参加卫生部室间质评都取得很好的成绩,确实认为该公司试剂质量好。但是拥有高质量试剂并不意味着绝对获得准确的检验结果,因此把我们在实际使用过程中的一些体会写出来,供大家参考,以便更 好地使用伊利康试剂,充分提高检验结果的准确性,从而更好地为临床服务。
 
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